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BUNSEN本生帶您了解ELISA試劑盒失敗的原因
成功的實(shí)驗(yàn)是個(gè)循序漸進(jìn)的過(guò)程影響EL ISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素有很多只有的掌握了實(shí)驗(yàn)的細(xì)節(jié)才能購(gòu)做出好的實(shí)驗(yàn)。 您可知您的ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)為什么會(huì)失敗?下面天津本生小編帶大家了解一下。
一、標(biāo)本的影響
溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用E1 ISA法檢測(cè)易產(chǎn)生假陽(yáng)性。可能是溶血血清中含有過(guò)氧化酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素)在洗滌過(guò)程中往往難以洗脫它可使H202釋放出原生態(tài)氧 (0)從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)即顯藍(lán)色產(chǎn)生假陽(yáng)性。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。
二、標(biāo)本受細(xì)菌污染
因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶因此 被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本樣 亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。
三、標(biāo)本保存不擋
在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深 造成假陽(yáng)性;為克服 上述干擾ELISA試劑盒測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測(cè)定5d內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4°C,1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存 ;凍存后融解的標(biāo)本 蛋白質(zhì)局部濃縮分布不均 應(yīng)充分混合后再測(cè)定但混勻時(shí)應(yīng)輕柔不可強(qiáng)烈振蕩。
四、標(biāo)本凝固不全
在工作中有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè) 常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清使血清中仍殘留部分纖維蛋白原 在EL ISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊易造成假陽(yáng)性結(jié)果 ;因此血波標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
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