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Elisa實驗：稀釋標(biāo)準(zhǔn)品實驗步驟
以下是ELISA實驗中標(biāo)準(zhǔn)品稀釋的詳細(xì)步驟總結(jié)，綜合多個實驗操作視頻的關(guān)鍵步驟：
一、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋前準(zhǔn)備?
試劑與耗材?
7支空白EP管(編號S0-S6)
標(biāo)準(zhǔn)品樣本稀釋液(如1x PBS或說明書指定緩沖液) 本生試劑盒
渦旋振蕩器、移液器(建議10-100μL和100-1000μL規(guī)格)
標(biāo)準(zhǔn)品活化?
凍干標(biāo)準(zhǔn)品需先離心1-2分鐘使粉末集中管底
加入指定體積蒸餾水(如200μL)，渦旋混勻5秒，靜置10-30分鐘至溶解
二、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋步驟?
初始稀釋?
在S6管中加入500μL標(biāo)準(zhǔn)品樣本稀釋液
吸取溶解后的標(biāo)準(zhǔn)品母液500μL加入S6管，渦旋混勻5秒
倍比稀釋?
從S6管取500μL加入S5管，混勻
重復(fù)上述步驟至S1管，S0管僅含稀釋液(空白對照)
關(guān)鍵點：每次稀釋需充分混勻，避免濃度誤差
特殊處理?
高濃度標(biāo)準(zhǔn)品(如血清樣本)需酸化處理：加鹽酸20μL混勻，孵育10分鐘后加氫氧化鈉20μL終止
三、稀釋后操作?
分裝與保存?
現(xiàn)配現(xiàn)用，避免反復(fù)凍融
分裝體積建議：50μL/孔(酶標(biāo)板使用)
質(zhì)量控制?
檢查各管液體混勻狀態(tài)，避免沉淀
酸化樣本需20倍稀釋后使用
四、常見問題規(guī)避?
錯誤示例?：未充分混勻?qū)е绿荻炔痪€性
解決方案?：使用排槍或自動移液器降低操作誤差
(注：具體稀釋比例需根據(jù)試劑盒說明書調(diào)整，不同廠家標(biāo)準(zhǔn)品濃度可能差異較大)
注：以上資料僅供參考，具體產(chǎn)品信息請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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