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ELISA試劑盒酶標板孵育時間介紹
ELISA試劑盒酶標板孵育時間需根據試劑盒類型和實驗要求調整,具體如下:
一、常規孵育時間參考?
國內試劑盒?
通常為 ?37℃孵育30分鐘至1小時?,低于1小時可能影響檢測下限?。
進口試劑盒?
推薦 ?37℃孵育1-2小時?,以確保抗原抗體充分結合?。
二、關鍵影響因素?
溫度與時間關系?:溫度越高,所需時間越短(如37℃需1小時,4℃可能需過夜)?。
實驗類型差異?:
夾心法ELISA需更長時間(如2小時)以確保捕獲抗體與抗原結合?。
競爭法ELISA可能縮短孵育時間(需參考具體試劑盒說明)?。
三、操作建議?
預實驗優化?:若結果不穩定,可延長孵育時間至2小時或調整溫度?。
避免誤差?:
確保孵育箱溫度均勻,避免邊緣孔受熱不均?。
顯色前充分洗滌(3-5次),減少非特異性結合干擾?。
四、特殊案例?
包被抗原實驗?:4℃過夜孵育(12-16小時)可增強結合穩定性?。
細胞培養上清檢測?:37℃孵育1小時后需結合封閉步驟(如1% BSA封閉1小時)?。
注:以上資料僅供參考,不作為實驗依據,具體產品說明請咨詢品牌供應商或技術老師。
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