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人白介素23(IL-23)ELISA檢測試劑盒技術(shù)說明書
BS-0194 人白介素23(IL-23)ELISA試劑盒 本生試劑盒
一、產(chǎn)品概述
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)技術(shù)，專用于定量檢測人血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的白介素23(IL-23)濃度。? 核心組件包括預(yù)包被抗體的酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記檢測抗體及顯色底物(TMB)，確保高靈敏度(低至0.15 pg/mL)與特異性。 實驗全程約3.5小時，適用于科研實驗，嚴(yán)禁臨床診斷用途。?
二、檢測原理
抗體結(jié)合?：IL-23與預(yù)包被捕獲抗體結(jié)合形成復(fù)合物。?
加入生物素化檢測抗體及辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素，通過酶促反應(yīng)顯色。
定量分析?：TMB底物顯色后，終止液終止反應(yīng)，450 nm波長測吸光度值，IL-23濃度與OD值呈正相關(guān)。?
三、試劑盒組成
| 組分 | 規(guī)格/數(shù)量 | 儲存條件 |
|-||-|
| 預(yù)包被酶標(biāo)板 | 96孔/板 | 2-8℃避光 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉) | 2瓶 | -20℃長期保存 |
| 生物素標(biāo)記抗體 | 1支(濃縮液) | 2-8℃短期 |
| 顯色底物(TMB) | 12 mL | 2-8℃避光 |
| 終止液 | 12 mL | 室溫 |
| 20×洗滌液 | 50 mL | 室溫 |
注：樣本稀釋液需按樣本類型(血清/血漿/細(xì)胞上清)選擇專用稀釋液。
四、樣本處理
血清/血漿?：室溫凝固30分鐘，1000×g離心15分鐘，取上清液避免溶血。
細(xì)胞上清?：直接離心去除細(xì)胞碎片，未檢測樣本需分裝后-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
組織勻漿?：按組織重量加入裂解液勻漿后離心取上清。?
五、操作步驟
試劑平衡?：所有組分室溫靜置20分鐘，濃縮洗滌液水浴溶解結(jié)晶。?
加樣反應(yīng)?：
標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋后加入酶標(biāo)孔，樣本體積25 μL。?
依次加入檢測抗體、酶標(biāo)復(fù)合物，37℃孵育60分鐘。
洗滌顯色?：洗滌液洗滌3次，加入TMB底物避光反應(yīng)15分鐘，終止液終止。?
讀數(shù)?：酶標(biāo)儀450 nm波長測定OD值，四參數(shù)擬合計算濃度。
六、性能參數(shù)
檢測范圍?：15.6–1000 pg/mL(線性區(qū)間)。
靈敏度?：0.15 pg/mL。
精密度?：板內(nèi)/板間變異系數(shù)(CV)<10%。?
回收率?：80%-120%。
七、注意事項
安全防護(hù)?：操作時穿戴手套、護(hù)目鏡，避免接觸終止液及TMB底物。?
試劑保存?：未開啟試劑盒2-8℃可存6個月，-20℃可存1年;已開啟試劑需7日內(nèi)用完。
實驗規(guī)范?：
不同批次試劑禁止混用。?
洗滌時拍干酶標(biāo)板，避免吸水紙直接接觸孔內(nèi)。?
顯色反應(yīng)需避光，終止后30分鐘內(nèi)讀數(shù)。
注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。
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